Особенности теста Фемофлор 16

Влагалищный биоценоз представлен совокупностью микроорганизмов, нужный состав и функционирование которых обеспечивают здоровый иммунитет и нормальный гомеостаз как локальной среды, так и всего женского организма.

Под влиянием разнообразных факторов характеристики микрофлоры могут изменяться, но, в целом, она стремится к равновесному состоянию. Для оценки состояния биоценоза половых органов женщины используются разнообразные лабораторные техники, одной из которых является «Фемофлор» – современная методика, основанная на ПЦР (полимеразной цепной реакции). Анализ проводится в режиме реального времени и позволяет получить исчерпывающую информацию о соотношении полезных и условно-патогенных микроорганизмов. Рассматриваемый тест отличается от аналогичных возможностью оценки широкого ряда количественных и качественных показателей, высокой чувствительностью, способностью выявить и изучить труднокультивируемые анаэробные бактерии. Исследование незаменимо для диагностики дисбаланса урегенитальной флоры, оценки его тяжести и назначения эффективного лечения.

В зависимости от количества изучаемых бактерий обследованию присваивается индекс. Так, если в ходе диагностики используются реагенты для выявления 16 бактерий, то такой тест носит название Фемофлор 16.

Что представляет собой такое исследование, кому назначается и какие выполняет задачи, рассмотрим в этой статье.

Содержание

• 1 Микрофлора влагалища
  • 1.1 При беременности
• 2 Фемофлор-скрининг: что это такое
  • 2.1 Наборы реагентов
• 3 Показания и подготовка к проведению анализа
  • 3.1 Показания: Фемофлор 8 и 13
  • 3.2 Фемофлор 16 (17)
  • 3.3 Фемофлор скрин
• 4 Правила забора и транспортировки материала
  • 4.1 Забор из заднебокового свода
  • 4.2 Забор из цервикального канала
  • 4.3 Забор отделяемого мочеиспускательного канала
• 5 Оценка и расшифровка результатов
  • 5.1 Оценка общей обсемененности
  • 5.2 Исследование нормофлоры влагалища
  • 5.3 Исследование состава факультативной флоры
  • 5.4 Какие инфекции входят в скрининг Фемофлор 16
  • 5.5 Что показывает Фемофлор 13
  • 5.6 Что находит анализ Фемофлор 8
• 6 Преимущества и недостатки метода
• 7 Цена исследования
• 8 Какие болезни помогает определить Фемофлор
  • 8.1 Диагностика вагинита
  • 8.2 Чем опасен вагинит
  • 8.3 Определение молочницы
  • 8.4 Лечение БВ
  • 8.5 Меры профилактики
• 9 Фемофлор 16

Микрофлора влагалища

Урогенитальный тракт – чувствительная среда, на изменение нормального состава микробиоты в которой могут влиять разнообразные факторы:

• возраст;
• образ жизни, система питания;
• наличие постоянного полового партнера, его смена;
• используемый метод контрацепции;
• прием антибиотиков и гормональных препаратов;
• общий гормональный и иммунный статусы;
• общий и специальный гинекологический анамнезы;
• беременности и роды;
• заболевания других органов и систем.

Все перечисленные факты могут оказывать влияние на состояние влагалищной флоры: как относительно безобидное, так и негативное, вплоть до развития заболеваний. Причем в большей степени играют роль не столько качественные характеристики, сколько количественное соотношение микроорганизмов.

При беременности

Нормальный биоценоз – важное условие здоровья женщины. Но еще большее значение его соблюдение приобретает для полноценной реализации репродуктивной функции.

Дисбиотические нарушения и распространение инфекций в организме беременной пациентки приводят к внутриутробному инфицированию, возникновению патологий у плода, провоцируют выкидыши, преждевременные роды, иные отклонения в нормальном течении процесса вынашивания ребенка.

Фемофлор-скрининг: что это такое

Фемофлор– это инновационная диагностическая система, позволяющая исследовать микрофлору женских половых органов путем определения и идентификации ДНК-бактерий. На основе сопоставления с нормальными значениями их количественных и качественных характеристик делают вывод об отсутствии или наличии гинекологических патологий.

Зачем нужен такой анализ:

• для определения общей бактериальной массы;
• для количественной оценки нормальной микробиоты;
• для выявления факультативной флоры и определения ее взаимодействия с нормофлорой;
• для контроля правильности получения образца биоматериала с помощью КВМ – критерия корректного забора материала. Он отображает относительное количество клеток эпителия.

Принцип действия теста основывается на полимеразной цепной реакции (ПЦР) с увеличением копий ДНК. Стандартная ПЦР состоит из трех этапов: расплетения цепей ДНК, присоединения праймеров (коротких нитей, необходимых для продуцирования нуклеиновых кислот) и зарождения новых цепочек. Для выполнения анализа количество взятого материала не имеет значения, реакция произойдет даже при минимальном его количестве.

В зависимости от целей обследования пациенткам назначают Фемофлор 4, Фемофлор 8 (Фемофлор 9) или Фемофлор 16 (Фемофлор 17). Индексы возле названий комплектаций тестов обозначают количество исследуемых показателей. Существует еще и Фемофлор Скрин, который позволяет дополнительно обнаруживать специфические бактерии, вирусы и инфекции.

Наборы реагентов

Все наборы реагентов Фемофлор состоят из комплексов компонентов для исследования:

• общего количества микроорганизмов;
• состава нормофлоры (лактобактерий);
• количества и состава факультативной флоры. Перечень реагентов зависит от комплектации теста.

Каждый набор включает вспомогательные элементы:

• контрольную пробирку, предназначенную для контроля правильности процесса забора материала;
• пробирку для обнаружения генома ДНК человека, содержимое которой позволяет сделать вывод о применимости полученного образца для анализа.

Все реакционные смеси содержат ДНК-зонд, снабженный флуоресцентным компонентом, выполняющим роль метки, и гасителем флуоресценции. Как только получают достаточное количество амплификатов ДНК, действие гасителя прекращается. Чем больше появляется специфических копий, тем ярче свечение.

Для повышения чувствительности теста используют метод «горячего старта». Для этого смесь реагентов искусственно разделена на две части с парафиновой прослойкой. Повышение температуры достигается путем плавления парафина в детекторе, слои смешиваются, и начинается реакция.

Показания и подготовка к проведению анализа

Общими показаниями к диагностике Фемофлор являются:

• изучение количественных и качественных параметров влагалищной микробиоты;
• профилактическое обследование здоровых пациентов;
• планирование беременности, в том числе подготовка к ЭКО;
• плановые скрининги при беременности (во всех триместрах), наряду с УЗИ и биохимическим анализом крови;
• необходимость идентификации инфекционного агента при наличии сопутствующей симптоматики (неспецифические бели, неприятный запах);
• подозрение на бактериальный вагиноз, анализ патогенной составляющей;
• дифференциальная диагностика заболеваний половой сферы, в том числе при несоответствии клинических и лабораторных результатов;
• предоперационная подготовка;
• мониторинг эффективности назначенного лечения;
• контроль восстановления нормального биоценоза;
• обнаружение абсолютных патогенов (хламидии, трихомонады, гонококки) – в формате Фемофлор Скрин.

Существуют и специфические показания, исходя из которых определяют комплектацию назначаемого теста.

Так, стандартный анализ Фемофлор 4 проводится с целью оценки сбалансированности биоценоза, а также для диагностики бактериального вагиноза, вульвовагинального кандидоза и контроля назначенной терапии. Исследуемые показатели: общая бактериальная масса, лактобактерии, облигатно-анаэробные микроорганизмы, грибы Кандида.

Скрининг по методу Фемофлор может проводиться без ограничений, противопоказания к нему отсутствуют.

Подготовка к процедуре предусматривает выполнение следующих правил:

• прекратить прием антибиотиков, эубиотиков и пробиотиков не позднее, чем за две недели до сдачи анализа;
• исключить половые контакты непосредственно перед обследованием, незащищенные – за двое суток;
• не использовать тампоны, не делать спринцевание как минимум за день до теста;
• кольпоскопия и трансвагинальное УЗИ, пройденные менее, чем за двое суток, способны исказить результаты;
• в назначенный день нельзя выполнять гигиенические процедуры с использованием косметических средств;
• за полтора часа рекомендуется воздержаться от мочеиспускания.

Показания: Фемофлор 8 и 13

Фемофлор 8 позволяет провести более детальную оценку микрофлоры урогенитальной зоны, чем стандартный тест. Назначается для диагностики неспецифического вагинита. Биоматериал дополнительно исследуется на ряд анаэробных бактерий (энтеробактерии, эубактерии, сптрептококки, стафилококки) и микоплазмы.

Фемофлор 13 помогает изучить количественный и качественный состав взятого образца на наличие микроорганизмов. По сравнению с предыдущей версией с таким тестом можно обнаружить ряд патогенов, что часто способствует определению причины бесплодия.

Фемофлор 16 (17)

Фемофлор 16, который, с учетом показателя общей бактериальной массы, правильней называть Фемофлор 17, предназначен для детального анализа влагалищного биоценоза. Он показан для диагностики рецидивирующих инфекционных заболеваний, позволяет полноценно подготовиться к зачатию, в том числе по методу ЭКО, хирургическим операциям на женских половых органах, установке внутриматочной спирали, а также для оценки эффективности проводимого лечения.

Реагенты, входящие в состав этого комплекта, дополнительно помогают выявить и проанализировать еще 8 представителей облигатной и факультативной флоры – анаэробные грамотрицательные и грамположительные палочки, кокки, коккобациллы.

Фемофлор скрин

Фемофлор Скрин – специфическое обследование, цель которого состоит в обнаружении некоторых инфекций и вирусов: гонореи, герпеса, трихомониаза. В обязательном порядке его проведение необходимо при невыясненных причинах бесплодия, патологиях беременности, возникновении спаек в органах малого таза, хронических воспалительных процессах в придатках матки (цервицитах, кольпитах и других).

Правила забора и транспортировки материала

Для проведения анализа микробиоты по методу Фемофлор Скрин/4/8/16 соскоб может браться из:

• заднебокового свода влагалища;
• цервикального канала шейки матки;
• мочеиспускательного канала.

Техники забора отделяемого секрета, а также требования к его транспортировке, для каждого из этих способов различаются. Рассмотрим подробнее эти варианты.

Забор из заднебокового свода

Материал для исследования представляет собой некоторое количество эпителиальных клеток, необходимых для анализа микрофлоры влагалища. Забор производится во время профилактического осмотра с помощью гинекологических зеркал строго до выполнения мануального обследования. Важным условием является отсутствие в зоне мазка патологической слизи и крови, которые, при необходимости, удаляются посредством ватного тампона механическим способом.

Получение мазка на флору производится специальным одноразовым зондом. Впоследствии материал перемещается в маркированную микропробирку с питательной средой, плотно закрывающуюся крышкой. Как правило, используется продукция немецкого производителя Эппендорф. Зонд утилизируется.

Забор из цервикального канала

Материал из цервикального канала шейки матки берут при подозрении на воспалительный процесс (цервицит) и другие патологии в этой области.

Если очаг воспаления отражается в гинекологическом зеркале, соскоб выполняют в зоне поражения. При недостаточной видимости специальный зонд вводится в цервикальный канал не глубже, чем на 1,5 см.  Затем этим инструментом описывается круговое движение с целью получения материала по периметру, после чего его аккуратно извлекают. Важно при этом не задеть стенки влагалища, поскольку информативность такого анализа будет сомнительной.

При наличии посторонних примесей и слизи в зоне выполнения мазка, ее очищают стерильным ватным тампоном, обрабатывают раствором натрия хлорида (концентрация – 0,9%), после чего приступают к процедуре.

Хранение происходит так же, как и при получении эпителия из заднебокового свода.

Забор отделяемого мочеиспускательного канала

Перед забором материала из мочеиспускательного канала наружное отверстие обрабатывается 0,9%-ным раствором натрия хлорида. После подготовительных манипуляций четким движением на глубину 1-1,5 см вводится зонд, а затем так же извлекается.

Если у пациентки наблюдаются слизистые или гнойные выделения, двухчасовой интервал между последним мочеиспусканием и началом процедуры соблюдать бессмысленно.

Соскоб помещается в пробирку, маркируется и транспортируется лаборантом, имеющим соответствующую квалификацию. Допускается хранение объекта анализа при температуре -20°С не более одного месяца.

Оценка и расшифровка результатов

Расшифровка анализа содержимого по методу Фемофлор 16 начинается с оценки качества выполненного соскоба. Индикатором правильно полученного образца считается достаточное количество геномной ДНК, содержащейся в эпителиальных клетках. Норма КВМ (качество взятия материала) – 105 и выше. При значении показателя, равном 104 и ниже, информативность исследования считается недостаточной, и требуется взятие повторной пробы.

Если значение КВМ удовлетворяет требованиям, приступают к изучению основных параметров.

Оценка общей обсемененности

Критерием оценки общей обсемененности является общая бактериальная масса, то есть количество бактерий в исследуемом образце. Нормальное значение показателя варьируется в диапазоне 108-109 ГЭ/образец.

Уменьшение бактериальной массы (ниже 105 ГЭ/образец) может быть последствием пройденного курса антибактериальной или антисептической терапии. В этом случае рекомендуется сдать повторный анализ спустя две недели.

Снижение показателя наблюдается у женщин в предклимактическом периоде и в завершающей фазе климактерия, что свидетельствует о наступлении естественных атрофических процессов.

Исследование нормофлоры влагалища

Нормальная микрофлора женской урогенитальной зоны полностью состоит из лактобацилл. В идеале их масса равна общей бактериальной – 108-109 ГЭ/образец.

Анализ Фемофлор 16 позволяет вычислить общую массу микроорганизмов, а также соотношение объема нормофлоры (Lactobacillus spp) и представителей факультативной флоры. Исходя из полученного результата делают вывод о состоянии биоценоза:

• нормоценез, если удельный вес лактобацилл – не менее 95%;
• умеренный дисбиоз, если доля Lactobacillus spp – от 80% до 95%;
• выраженный дисбиоз, если концентрация лактобацилл находится в диапазоне между 20% и 80%;
• крайне выраженный дисбиоз, если содержание нормофлоры не превышает 20%.

Исследование состава факультативной флоры

При диагностике нарушения биоценоза следует сделать вывод о его характере. При превалировании факультативно-анаэробной флоры говорят об аэробном дисбиозе; если же преобладают облигатно-анаэробные микроорганизмы, то – об анаэробном. При примерно равном соотношении микробиоты обоих видов делают вывод о смешанной этиологии.

К факультативно-анаэробной флоре относятся Enterobacterium spp., Streptococcus spp. и Staphylococcus spp., суммарное содержание которых в образце не должно превышать 102-104 КОЕ/мл.

Микробактерий, относящихся к облигатно-анаэробной флоре, гораздо больше. Максимальное их количество составляет:

• Sneathia spp., Leptotrihia spp. и Fusobacterium spp. – 104 КОЕ/мл;
• Gardnerella vaginalis, Prevotella bivia и Porphyromonas spp. – 102-104 КОЕ/мл;
• Eubacterium spp. – 102-104 КОЕ/мл;
• Mobyluncus spp. и Corynebacterium spp. – 104 КОЕ/мл;
• Megasphaera spp., Veilonella spp. и Dialister spp. – 104 КОЕ/мл;
• Lachnobacterium spp. и Clostridium spp. – 104 КОЕ/мл;
• Peptostreptococcus spp. – 104 КОЕ/мл;
• Atopobium vaginae – 104 КОЕ/мл.

Предельное количество дрожжевых грибов Candida spp. равно 103 КОЕ/мл.

В ходе исследования выявляются и микоплазмы – Mycoplasma hominis и Ureaplasma. Их нормальное значение – до 103 КОЕ/мл.

Какие инфекции входят в скрининг Фемофлор 16

После проведения анализа по методу Фемофлор 16 стандартная расшифровка содержит значение общей бактериальной массы, а также описание микроорганизмов, относящихся в нормальной и факультативной флоре. Для выявления патогенной биоты потребуется дополнительное проведение Фемофлор Скрин. Он предназначен для обнаружения Mycoplasma genitalium (микоплазмоз), Neisseria gonorrhoeae (гонорея), Trichomonas vaginalis (трихомониаз), Chlamydia trachomatis (хламидиоз), Herpesvirus 1 и 2 (генитальный герпес), Citomegalovirus (цитомегаловирусная инфекция). В норме возбудители этих заболеваний присутствовать не должны.

Что показывает Фемофлор 13

Анализ с набором реагентов Фемофлор 13 представляет собой комплексный тест, совмещающий показатели Фемофлор 8 и Фемофлор скрин. Кроме лактобактерий, энтеробактерий, эубактерий, стрептококков, гарднарелл, микоплазмы и дрожжевых грибов выявляется 7 безусловных патогенов.

Что находит анализ Фемофлор 8

Фемофлор 8 – сокращенная версия анализа. При выборе этого варианта не изучаются микоплазмы и большая часть облигатно-анаэробной флоры. Тем не менее, проводится полноценное исследование и оценка количества лактобацилл, аэробной биоты и грибов Кандида. Этого достаточно для постановки диагнозов вагинальный кандидоз и, реже, – бактериальный вагиноз.

Преимущества и недостатки метода

Фемофлор – инновационный метод анализа биоценоза влагалища. Его преимущества:

• высокая чувствительность при диагностике дисбиоза;
• широкий перечень выявляемых микроорганизмов, включая патогенные (при проведении Фемофлор скрин);
• скорость и простота;
• минимальная зависимость от человеческого фактора;
• отсутствие противопоказаний.

К недостаткам можно отнести необходимость соблюдения правил подготовки к процедуре и ее дороговизну.

Цена исследования

К сожалению, рассматриваемый анализ не отнесен к перечню бесплатных обследований. Его стоимость зависит от набора реагентов и ценовой политики клиники. Анализ Фемофлор 16 (17) в среднем обойдется в 1600-2000 рублей, Фемофлор 8 (9) – 1200-1500 рублей, скрининг на патогены – 1500-1900 рублей.

Какие болезни помогает определить Фемофлор

Главная задача Фемофлора – анализ влагалищного биоценоза. Любое отклонение от нормы – уже признак патологии, самая безобидная из которых – дисбактериоз, то есть снижение общей бактериальной массы и лактобацилл, в частности.

Повышенный удельный вес аэробов и анаэробов (дисбиоз) говорит о бактериальном вагинозе, вызванном тем или иным возбудителем. Если наблюдается рост количества грибов Candida cpp., диагностируют вагинальный кандидоз. Увеличение доли микоплазмов означает микоплазмоз или уреаплазмоз (в зависимости от типа выявленных микроорганизмов), неспецифический вагинит, а также, с большой вероятностью, – уретрит.

Диагностика вагинита

Вагинит – воспаление слизистой оболочки влагалища – является частым сопутствующим заболеванием при дисбиозе. Диагностика вагинитов основывается на клинической симптоматике, определении водородного показателя выделений, их микроскопическом исследовании.

Фемофлор – самый эффективный способ диагностики неспецифических (бактериальных, грибковых, вирусных и смешанных) вагинитов. Он помогает определить причину возникновения болезни путем подробного исследования факультативной микрофлоры. При выполнении теста Фемофлор Скрин доступно выявление специфических вагинитов, вызываемых гонококком, трихомонадой, хламидией, микоплазмой, уреаплазмой.

Чем опасен вагинит

Отсутствие своевременного лечения отрицательно влияет на иммунитет пациентки, повышая риск ее заражения венерическими заболеваниями и ВИЧ. Болезнь также может трансформироваться в воспаление матки и придатков.

Запущенные формы вагинита крайне опасны при беременности, поскольку увеличивают вероятность внутриутробного инфицирования, выкидыша, преждевременных родов. После родоразрешения женщина подвергается угрозе развития метрита, эндометрита, перитонита, сепсиса.

Определение молочницы

Молочница, или вагинальный кандидоз, – весьма распространенное заболевание. Он вызывается дрожжевыми грибами Кандида, которые в небольшом количестве, чаще всего, присутствуют в урогенитальной зоне и на коже вокруг нее. Определенные факторы могут спровоцировать интенсивное размножение Candida spp., что вызывает специфическую дискомфортную симптоматику – творожистые выделения, покраснение, зуд, жжение, даже боль.

Лечение БВ

На основании выявленных в ходе анализа количества ключевых клеток БВ (бактериального вагиноза) принимается решение о схеме лечения. Стандартная терапия предполагает курсовой прием антибактериальных препаратов группы нитроимидазолов – метронидазол, трихопол, флагил и так далее. Одинаково эффективны как таблетки, так и локальные гели, кремы.

Меры профилактики

Следует понимать, что микроорганизмы, в том числе те, которые относятся к факультативной флоре, в небольшом количестве уже присутствуют в организме женщины. Это означает, что «занести» их невозможно. Важно исключить факторы, приводящие к нарушению нормального баланса микрофлоры – лактобацилл и условно-патогенных микробов. К ним относятся:

• частое спринцевание;
• смена полового партнера;
• использование контрацептивов, обработанных 9-ноносинолом;
• недавний прием антибиотиков.

Фемофлор 16

Фемофлор 16 – современная высокочувствительная тест-система, позволяющая детально оценить состояние микрофлоры женских половых органов. В процессе анализа исследуется 16 ключевых показателей локального биоценоза. Благодаря этой простой и удобной технологии установление причин бактериального дисбаланса выполняется с точностью до 95%.